История создания датчика движения: Первый прибор для обнаружения движения был изобретен немецким физиком Генрихом Герцем...
Механическое удерживание земляных масс: Механическое удерживание земляных масс на склоне обеспечивают контрфорсными сооружениями различных конструкций...
Топ:
Проблема типологии научных революций: Глобальные научные революции и типы научной рациональности...
Устройство и оснащение процедурного кабинета: Решающая роль в обеспечении правильного лечения пациентов отводится процедурной медсестре...
Процедура выполнения команд. Рабочий цикл процессора: Функционирование процессора в основном состоит из повторяющихся рабочих циклов, каждый из которых соответствует...
Интересное:
Наиболее распространенные виды рака: Раковая опухоль — это самостоятельное новообразование, которое может возникнуть и от повышенного давления...
Берегоукрепление оползневых склонов: На прибрежных склонах основной причиной развития оползневых процессов является подмыв водами рек естественных склонов...
Отражение на счетах бухгалтерского учета процесса приобретения: Процесс заготовления представляет систему экономических событий, включающих приобретение организацией у поставщиков сырья...
Дисциплины:
2017-07-09 | 211 |
5.00
из
|
Заказать работу |
|
|
Zur Charakterisierung der Fettverteilung in Schäumen wurden diese fluoreszenzmikrosko-
pisch untersucht. Ziel war es, mit Hilfe dieser Methode eine genauere Betrachtung der Fett-
kugeln zu ermöglichen. Zur Untersuchung der fetthaltigen Schäume wurde ein Forschungs-
Mikroskop mit einem Fluoreszenzkondensor (BX 50, Fa. Olympus, Hamburg) verwendet.
Zum Anfärben der Fette in den Schäumen wurde der Fluoreszenzfarbstoff Nilrot verwendet.
Dieser Farbstoff ist löslich und stark fluoreszierend in organischen Lösungen und eignet sich
zum Anfärben von Fetten [Greenspan & Stanley, 1985]. Nilrot wurde in Azeton gelöst
(0,01 %). Durch die Zugabe einer Fuchsinlösung (0,01 %) konnte der Kontrast der mikrosko-
pischen Bilder erhöht werden [King, 1955]. Der Schaum wurde auf den Objektträger aufge-
tragen und jeweils ein Tropfen Nilrot- und Fuchsinlösung dazugegeben. Die Anregung des
Fluoreszenzfarbstoffes erfolgte mit einer Halogenlampe (100 W, Fa. Philips).
Zusätzlich wurde untersucht, ob es auch bei einer direkten Zugabe der Nilrotlösung zu der
Milchprobe vor dem Aufschäumen zu einer Schaumbildung kommt. Hierzu wurde 1 ml Nil-
rotlösung in die Milchprobe gegeben und anschließend aufgeschäumt. Mit Hilfe einer Digi-
talkamera (Polaroid Model DMC1, Polaroid Corporation, Cambridge/USA) wurden Bilder
der Schäume aufgenommen.
3.5.5 Präparation der Schäume für elektronenmikroskopische Untersuchungen
Um detaillierte Erkenntnisse über den Aufbau der Grenzfläche Luft/Wasser in Milchschäu-
men zu erhalten, wurden die Schäume elektronenmikroskopisch untersucht. Als Probenmate-
rial wurden frisch aufgeschäumte Milchproben sowie Milchschäume nach einer Standzeit von
20 Minuten verwendet. Für die Elektronenmikroskopie müssen sehr dünne (0,1 µm) und im
Vakuum beständige Präparate hergestellt werden. Daher wurden die Proben in flüssigem Pro-
panstrahl eingefroren und ein Präparatabdruck (Gefrierbruchtechnik) hergestellt.
Page 52 |
3.5.5.1 Einfrieren der Schäume
Die Schäume wurden im flüssigen Propanstrahl eingefroren (Jet-Gefriergerät JFD 030, Bal-
zers, Lichtenstein). Eine Übersicht des Präparationsvorgangs ist in Abbildung 3.6 dargestellt.
Eine Spatelspitze Schaum wurde auf ein Goldträgernetzchen (0,7 µm dick, 3,05 mm Durch-
messer, Gilder Netzchen, BAL-TEC, Witten/Deutschland) aufgebracht (2) und das Netzchen
mit dem Schaum auf ein kupfernes Trägerplättchen (flache Oberfläche, 4,5 mm x 3 mm,
0,6 mm hoch, BAL-TEC, Witten/Deutschland) platziert (3). Ein zweites Trägerplättchen (mit
Vertiefung, 4,5 mm x 3 mm, 0,6 mm hoch, BAL-TEC, Witten) wurde oben aufgesetzt (4-5).
Dieses „Präparat-Sandwich“ wurde in den Probenhalter eingesetzt und in das Jet-Gefriergerät
|
(JFD 030, Balzers, Lichtenstein) überführt. Beim Herunterdrücken des Probenhalters wurde
kurzfristig ein Propangas-Ventil geöffnet und flüssiges Propan fror das „Präparat-Sandwich“
bei -180 °C ein. Anschließend wurden die Präparate aus dem Einfriergerät entnommen und in
flüssigen Stickstoff überführt.
Abb. 3.6: Herstellung eines Sandwich-Präparates (Quelle: Gebrauchsanleitung Jet-
Gefriergerät)
3.5.5.2 Herstellung des Präparatabdrucks (Gefrierbruchtechnik)
Es wurden jeweils drei der in flüssigen Stickstoff gelagerten Sandwich-Präparate in eine vor-
gekühlte Doppelabdruckeinrichtung (BAL-TEC,Witten) eingeführt. Die Abdruckeinrichtung
mit den drei Proben wurde in die Vakuumkammer einer Hochvakuum-Gefrierätzanlage
(BA 360 M, Balzers, Lichtenstein) gesetzt und befestigt. Der Objektträgertisch der Vakuum-
kammer wurde zur besseren Kälteübertragung mit flüssigem Frigen bepinselt. Die Kammer
wurde geschlossen und ein Hochvakuum aufgebaut. Bei einer Temperatur von –120 °C wurde
die Doppelabdruckeinrichtung aufgerissen, so dass die eingefrorenen Schäume gebrochen
wurden. Aus diesen Stücken ragten nun an manchen Stellen die in der Milch enthaltenen Teil-
chen wie Fettkügelchen und Caseinteilchen heraus oder waren entlang natürlicher Grenzflä-
chen aufgebrochen. In Abbildung 3.7 ist beispielhaft ein Überblick der erzeugten Strukturen
durch die Gefrierbruchtechnik abgebildet.
Page 53 |
Abb. 3.7: Gefrierbruchtechnik (Pt/C = Platin/Kohlenstoff; C = Kohlenstoff)
Die Brechung der Probe erfolgte entlang innerer Oberflächen. Wenn große Partikel, Fettku-
geln oder koalesziertes Fett vorlagen, konnten diese auch gebrochen werden. Damit die frei-
gelegten Objektdetails einer elektronenmikroskopischen Untersuchung zugeführt werden
konnten, wurde von der Oberfläche ein Abdruck hergestellt. Im Vakuum wurden Platin und
Kohlenstoff (Winkel 45 °) verdampft, wobei sich eine dünne Schicht auf dem Objekt nieder-
schlug. Zur Verstärkung wurde mit Kohlenstoff (Winkel 90 °) beschattet. Nach dem Auf-
dampfen der Abdruckschicht wurde die Vakuumanlage belüftet, die Kupferträger mit den
Goldträgernetzchen und den bedampften Bruchstücken entnommen, in destilliertes Wasser
gegeben und somit die Abdruckschicht isoliert. Um weitere Objektreste von der Kohle-Platin-
Schicht zu entfernen, wurde der Abdruck 30 Minuten in Chlorbleichlauge, wieder in destil-
liertes Wasser, Azeton und nochmals in destilliertes Wasser gegeben. Anschließend wurde der
Abdruck auf Papier getrocknet und konnte nun für die elektronenmikroskopischen Untersu-
chungen verwendet werden [Böhler, 1969, Buchheim, 1971, Kaláb, 1981, Schmidt &
Buchheim, 1992].
3.5.5.3
|
|
Организация стока поверхностных вод: Наибольшее количество влаги на земном шаре испаряется с поверхности морей и океанов (88‰)...
Своеобразие русской архитектуры: Основной материал – дерево – быстрота постройки, но недолговечность и необходимость деления...
Эмиссия газов от очистных сооружений канализации: В последние годы внимание мирового сообщества сосредоточено на экологических проблемах...
Индивидуальные очистные сооружения: К классу индивидуальных очистных сооружений относят сооружения, пропускная способность которых...
© cyberpedia.su 2017-2024 - Не является автором материалов. Исключительное право сохранено за автором текста.
Если вы не хотите, чтобы данный материал был у нас на сайте, перейдите по ссылке: Нарушение авторских прав. Мы поможем в написании вашей работы!