Автоматическое растормаживание колес: Тормозные устройства колес предназначены для уменьшения длины пробега и улучшения маневрирования ВС при...
Типы сооружений для обработки осадков: Септиками называются сооружения, в которых одновременно происходят осветление сточной жидкости...
Топ:
Оснащения врачебно-сестринской бригады.
Теоретическая значимость работы: Описание теоретической значимости (ценности) результатов исследования должно присутствовать во введении...
Проблема типологии научных революций: Глобальные научные революции и типы научной рациональности...
Интересное:
Инженерная защита территорий, зданий и сооружений от опасных геологических процессов: Изучение оползневых явлений, оценка устойчивости склонов и проектирование противооползневых сооружений — актуальнейшие задачи, стоящие перед отечественными...
Распространение рака на другие отдаленные от желудка органы: Характерных симптомов рака желудка не существует. Выраженные симптомы появляются, когда опухоль...
Отражение на счетах бухгалтерского учета процесса приобретения: Процесс заготовления представляет систему экономических событий, включающих приобретение организацией у поставщиков сырья...
Дисциплины:
2017-06-13 | 271 |
5.00
из
|
Заказать работу |
|
|
Гематологические методы исследования
Исследования проводились унифицированными методами, утверждёнными Министерством здравоохранения РФ, с использованием наборов фирмы «Агат» утверждённых Приказом Росздравнадзора.
Набор предназначен для количественного колориметрического определения содержания железа в сыворотке крови человека по реакции с динатриевой солью 3-(2-пиридил)-5,6-бис(4-сульфофенил)-1,2,4-триазина (феррозином) без депротеинизации в клинико-диагностических и биохимических лабораториях.
Принцип метода: Железо освобождается из железосвязывающих белков сыворотки крови и восстанавливается под действием кислого рабочего раствора, содержащего восстановитель (гидроксиламин) и детергент. Затем, после добавления буфера для создания в реакционной смеси необходимого рН (4,5–4,8) и феррозина, образуется устойчивый окрашенный железо-феррозиновый комплекс, интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации железа в анализируемом образце и измеряется фотометрически при 562 (560–580) нм. Для исключения влияния меди, содержащейся в сыворотке, в рабочий раствор включена тиомочевина.
Состав набора:
1. Рабочий раствор без гидроксиламина, 100 мл – 1 флакон;
2. Гидроксиламин, 4,0 г – 1 флакон;
3. Буфер (натрия ацетат), 25 мл – 1 флакон;
4. Раствор феррозина, (30 г/л), 0,8 мл – 1 флакон;
5. Калибровочный раствор железа (89,5 мкмоль/л), 5 мл – 1 флакон.
Аналитические характеристики набора:
Линейная область определения концентрации железа – в диапазоне от 3,58 до 89,5 мкмоль/л, отклонение от линейности – не более 5%.
Чувствительность определения – не более 1,8 мкмоль/л.
Воспроизводимость: коэффициент вариации не более 5%.
|
Качество набора можно оценивать по контрольным сывороткам отечественного или зарубежного производства, аттестованным данным методом. Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон нормальных величин у обследуемого контингента.
Оборудование и реагенты:
– Спектрофотометр, длина волны 562 нм, или фотоэлектроколориметр, длина волны 560–580 нм, кювета с толщиной поглощающего свет слоя 10 мм;
– пипетки, позволяющие отбирать объемы жидкости 0,02; 0,5 и 2,5 мл;
– пробирки пластмассовые одноразовые нестерильные вместимостью 5–10 мл;
– секундомер;
– вода дистиллированная;
– перчатки резиновые или пластиковые.
Анализируемые образцы: Сыворотка крови.
Подготовка реагентов для анализа:
Рабочий раствор. Содержимое флакона с гидроксиламином растворить при перемешивании в рабочем растворе.
Рабочий раствор можно хранить в плотно укупоренном виде при температуре +2–8° С не более 3-х месяцев.
Остальные реактивы готовы к использованию.
Проведение анализа:
Компоненты реакционной смеси внести в пробирки в количествах, указанных в таблице 1:
При измерении оптической плотности использовать кюветы с толщиной поглощающего свет слоя 10 мм. Окраска устойчива в течение 1 часа после окончания инкубации.
Таблица 1. Ход определения.
Отмерить, мл | Опытная проба | Калибровочная проба | Контрольная (холостая) проба |
Сыворотка крови | 0,50 | - | - |
Калибровочный раствор железа | - | 0,50 | - |
Рабочий раствор | 2,50 | 2,50 | 2,50 |
Содержимое пробирок тщательно перемешать и инкубировать в течении 30 минут при комнатной температуре (+18-25С) | |||
Буфер | 0,50 | 0,50 | 1,00 |
Содержимое пробирок тщательно перемешать и измерить оптическую плотность опытной пробы (E1) при 562 нм против воды | |||
E1 | |||
Раствор феррозина | 0,02 | 0,02 | 0,02 |
Содержимое пробирок тщательно перемешать, инкубировать в течении 5 минут при комнатной температура и измерить оптическую плотность опытной пробы (E2) и калибровочной пробы (Eк) при 562 нм против холостой пробы | |||
E2 | Eк |
|
Расчеты:
Концентрацию железа рассчитать по формуле:
E2 – E1
С = --------------- х 89,5,
Eк
где: С – концентрация железа в опытной пробе, мкмоль/л;
E2 и E1 – оптические плотности опытной пробы до и после добавления феррозина, соотоветственно, ед.опт.плотн.;
Eк – оптическая плотность калибровочной пробы, ед.опт.плотн.;
89,5 – концентрация железа в калибровочной пробе, мкмоль/л.
Примечание: при использовании кювет другого объема расход реагентов может быть пропорционально изменен.
Диагностическая информация:
При повышении концентрации железа в крови: пернициозная, апластическая и гемолитическая анемии; гемохроматоз, острая лейкемия, отравление свинцом, острый гепатит, і дефицит витамина В, талассемия, избыточное лечение железом, повторные переливания крови, острое отравление железом, нефрит.
При снижении концентрации железа в крови: железодефицитная анемия, ремиссия пернициозной анемии, острые и хронические инфекции, рак, нефроз, гипотиреоидизм, состояние после оперативного вмешательства.
Референтные пределы:
- Новорожденные - 17,8-44,8 мкмоль/л;
- Младенцы - 7,2-17,9 мкмоль/л;
- Дети - 9,0-21,5 мкмоль/л;
- Взрослые: мужчины - 11,6-31,3 мкмоль/л;
- женщины - 9,0-30.4 мкмоль
|
|
Опора деревянной одностоечной и способы укрепление угловых опор: Опоры ВЛ - конструкции, предназначенные для поддерживания проводов на необходимой высоте над землей, водой...
Архитектура электронного правительства: Единая архитектура – это методологический подход при создании системы управления государства, который строится...
Механическое удерживание земляных масс: Механическое удерживание земляных масс на склоне обеспечивают контрфорсными сооружениями различных конструкций...
Типы сооружений для обработки осадков: Септиками называются сооружения, в которых одновременно происходят осветление сточной жидкости...
© cyberpedia.su 2017-2024 - Не является автором материалов. Исключительное право сохранено за автором текста.
Если вы не хотите, чтобы данный материал был у нас на сайте, перейдите по ссылке: Нарушение авторских прав. Мы поможем в написании вашей работы!